ГОСТ 32519-2013 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Изучение хронической токсичности при внутрижелудочном поступлении

Обозначение:
ГОСТ 32519-2013 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Изучение хронической токсичности при внутрижелудочном поступлении
Тип:
ГОСТ
Название:
Дата актуализации текста:
Дата актуализации описания:
71.100.01
Дата последнего изменения:
Дата завершения срока действия:
gost34415
gost_32519-2013.docx PHPWord

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ПО ВОЗДЕЙСТВИЮ
ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ НА ОРГАНИЗМ

ЧЕЛОВЕКА

Изучение хронической токсичности при
внугрижелудочном поступлении

(OECD, Test №452:2008, IDT)

Издание официальное

Москва

Стамдартинформ

2014

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандар-
тизации установлены в ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положе-
ния» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударствен-
ные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия,
обновления и отмены»

Сведения о стандарте

Федеральным государственным унитарным предприятием «Всероссийский научно-исследова-
тельский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ» (ФГУП
«ВНИЦСМВ»)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование
страны по МК
(ИСО 3164) 004 - 97

Ков страны по МК
(ИСО 3164) 004 - 97

Сокращенное наименование
национального органа по

стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргыэсгандарт

Молдова

MD

Модцова-Стандарт

Россия

RU

Россгандарт

Таджикистан

TJ

Таджиксгакдарт

 

 

Перевод с английского языка (еп).

Степень соответствия - идентичная (ЮТ)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется е ежегодном
информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок - в
ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра
(замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет
опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты».
Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной
системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому
регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ. 2014

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроиз-
веден. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального
агентства по техническому регулированию и метрологии

Введение

Большая часть исследований хронической токсичности осуществляется на грызунах и. поэтому
данный стандарт предназначен, прежде всего, для исследований, осуществляемых на особях этого
вида. Если проведение таких исследований потребуется на особях другого вида, изложенные принци-
пы и методы также могут быть использованы с надлежащими изменениями в соответствии с целями и
руководством [2].

В исследованиях хронической токсичности используются три основных способа введения: перо-
ральный. накожный и ингаляционный. Выбор способа введения зависит от физических и химических
свойств тестируемого вещества, а также от основного пути поступления в организм человека. Дополни-
тельные сведения по выбору способа поступления в организм содержатся в руководстве [2].

В данном стандарте внимание уделяется енутрижелудочному (пероральному) способу введения,
как наиболее часто применяемому в исследованиях хронической токсичности.

Цели исследований хронической токсичности, охватываемые настоящим стандартом, включают:

•прогнозирование воздействия хронической токсичности на уровне организма человека:

•предоставление данных для проверки гипотез относительно механизма действия.

 

 

 

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ПО ВОЗДЕЙСТВИЮ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА

Изучение хронической токсичности при внутрижелудочном поступлении

Testing of chemicals of human hazard
Chronic toxicity studies

Дата введения — 2014—08—01

Настоящий стандарт устанавливает порядок проведения исследования хронической токсичности.
В оценке и анализе токсических свойств химического вещества до начала проведения исследования
испытательной лабораторией должна быть проанализирована вся доступная информация по исследу-
емому веществу с тем. чтобы сфокусировать план исследования для более успешного тестирования
возможной хронической токсичности и минимизировать использование животных. Данные, которые
будут содействовать проведению исследования, включают: идентификацию, химическую структуру и
физико-химические свойства исследуемого вещества: любую информацию о механизме действия; ре-
зультаты любых in vitro и in vivo исследований токсичности; предполагаемое использование и вероятное
воздействие на человеческий организм; доступные данные испытаний (Q)SAR и токсические свойства
структурно родственных веществ: имеющиеся токсикокинетические данные (однократная доза, а также
кинетика повторной дозы, при наличии) и данные, полученные из других исследований повторного воз-
действия. Изучение хронической токсичности может быть проведено после получения первоначальных
данных по изучению токсичности повторной дозы в течение 28 и/или 90 дней [3.4]. Поэтапный подход
к исследованию хронической токсичности следует рассматривать, как часть общей оценки возможного
неблагоприятного воздействия на здоровье определенного химического вещества.

Исследование хронической токсичности предоставляет информацию по возможной опасности
для здоровья, вероятно, возрастающей от повторяющихся воздействий в течение большей части про-
должительности жизни грызунов. Исследование позволяет выявить данные о токсическом воздействии
вещества, определить органы-мишени и возможность дозы кумуляции. Также в ходе его определяют
наивысший уровень воздействия, при котором не наблюдается вредный эффект воздействия (NOAEL),
что может быть использовано для установления критерия безопасности воздействия на организм чело-
века. Следует также подчеркнуть необходимость тщательного клинического наблюдения за животными
для получения максимально возможного количества информации.

В проведении исследования хронической токсичности необходимо всегда придерживаться осно-
вополагающих принципов и соображений, изложенных в [5].

Подробные правила и изучение принципов выбора дозы для исследований хронической токсич-
ности и канцерогенности можно найти в [2). Метод выбора основной дозы зависит от первоначальных
целей или задач исследования. При выборе подходящего уровня дозы должен быть достигнут баланс
между риском отсева с одной стороны и характеристикой ответных реакций на низкие дозы и их зна-
чимость - с другой. Это чрезвычайно важно в случае комбинированного исследования хронической
токсичности и канцерогенности.

Проведение комбинированного исследования хронической токсичности и канцерогенности тре-
бует большего анализа в сравнении с исследованиями хронической токсичности и канцерогенности.
проводимыми раздельно. Следует внимательно отнестись к принципам выбора при проведении ком-
бинированного исследования хронической токсичности и канцерогенности. Раздельные исследования
могут являться необходимыми по определенным нормативным требованиям.

Издание официальное

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

Исследуемое вещество вводится ежедневно порциями нескольким группам подопытных животных
в течение 12 месяцев, хотя можно также избрать более длительный или короткий период. Этот период
был выбран в связи с тем, что он достаточен для того, чтобы стали очевидны любые проявления куму-
лятивной токсичности, не смешиваясь при этом с проявлениями возрастных изменений. Отклонение
от продолжительности воздействия в 12 месяцев должно быть обосновано, особенно в случае сокра-
щения срока. Тестируемое вещество вводится перорально. План исследования может также включать
одно или несколько промежуточных умерщвлений, например, к трем и шести месяцам. Для этого не-
обходимо добавить дополнительные группы животных. В течение периода приема вещества животных
тщательно обследуют на предмет выявления признаков токсичности. Животные, которые умерли или
были умерщвлены в ходе тестирования, подвергаются аутопсии. По окончании исследования выжив-
ших животных умерщвляют и также проводят аутопсию.

Данный стандарт охватывает главным образом оценку и анализ хронической токсичности на грызунах, хотя
подобные исследования на негрызунах могут также проводиться в соответствии с данными требованиями. Вы-
бор вида животных должен быть обоснован. План и проведение исследования хронической токсичности на видах
негрыэуноа. когда это необходимо, должны быть основаны на принципах, содержащихся в данном стандарте, а
также в (6). Дополнительная информация по выбору вида и рода экслериментагъных животных содержится в (2].

Предпочтительным видом грызунов являются крысы, хотя могут использоваться и другие виды,
например, мыши. Крысы и мыши были выбраны в качестве экспериментальных моделей за их сравни-
тельно короткую продолжительность жизни, широкое применение е фармакологических и токсиколо-
гических исследованиях, их восприимчивость к индукции новообразований и доступность этих хорошо
изученных видов. Вследствие этих качеств, имеется большое количество информации об их психоло-
гии и патологии. Следует использовать молодых здоровых взрослых животных лабораторных видов.
Исследование хронической токсичности следует проводить на животных того же рода и того же проис-
хождения. что и животные, использовавшиеся е предварительных токсикологических исследованиях
небольшой продолжительности. Женские особи должны быть нерожавшими и не беременны.

Животные могут находиться отдельно или содержаться в клетках небольшими группами одного
пола. Отдельное проживание следует применять только, если это научно обосновано. Клетки надо раз-
мещать таким образом, чтобы свести к минимуму возможное влияние их местоположения. Температу-
ра в помещении с экспериментальными животными должна быть (22±3) С. Относительная влажность
должна быть как минимум 30 % и не должна превышать 70 % (если только не проводится уборка по-
мещения) оптимальная влажность от 50 % до 60 %. Освещение должно быть искусственным с после-
довательностью 12 часов - свет. 12 часов - темнота. Для кормления могут использоваться обычные
лабораторные диеты с неограниченным количеством питьевой воды. Диета должка отвечать всем по-
требностям в питании тестируемого вида. Содержание загрязняющих веществ, которые могут повлиять
на результаты исследования (остатки пестицидов, стойкие органические загрязнители, фитоэстрогены,
тяжелые металлы и микотоксины) должны быть по возможности минимизированы. Аналитические дан-
ные по питанию и уровню загрязняющих веществ в пище должны собираться периодически, как мини-
мум в начале исследования, и когда меняется ислольэуемая партия, и их следует включать в заключи*
тельный отчет. Должны также предоставляться аналитические данные по питьевой воде, используемой
в исследовании. На выбор пищи может влиять необходимость введения примеси и удовлетворение
пищевых потребностей животных, когда исследуемое вещество вводится в диетический рацион.

Должны использоваться здоровые животные, которые прошли акклиматизацию в лабораторных
условиях, как минимум в течение семи дней, и над которыми прежде не ставились эксперименты. В
случае с грызунами введение доз следует начинать как можно раньше, после отлучения от матери и
акклиматизации, желательно до того, как животным исполнится восемь недель. Тестируемые животные
должны быть описаны по роду. виду, происхождению, полу, массе и возрасту. В начале исследова-
ния разница в массе подопытных животных должна быть минимальна и не превышать ± 20 % от
средней массы всех животных, задействованных в исследовании, отдельно каждого пола. Животные
должны быть случайным образом распределены на контрольную и тестовую группы. После распреде-
ления заметной разницы в средней массе между группами каждого пола быть не должно. Если же ока
имеется, следует, по возможности, повторить распределение. Каждое животное должно быть помечено
индивидуальным идентификационным номером, и этот номер следует нанести на перманентной осно-
ве. с помощью татуировки, вживления микрочипа или другим подходящим способом.

Должны использоваться животные обоих полов. Следует использовать такое количество живот-
ных. чтобы по окончании исследования в каждой группе оставалось достаточное их количество для
биологического и статистического анализов. Как правило, грызунов - минимум 20 животных, негрызу-
нов - по четыре животных в каждой группе каждого пола для каждого уровня дозы. В исследованиях,
где задействованы мыши, может возникнуть необходимость в дополнительных животных в каждой груп-
пе для проведения всех необходимых гематологических анализов. В зависимости от цели исследова-
ния можно увеличить статистическую значимость основных показателей, распределив неравномерно
животных по уровням дозы.

При исследовании можно сделать резерв для промежуточных умерщвлений, например, в шесть
месяцев, для получения данных о развитии токсических изменений и данных о механизме воздействия,
если это научно обосновано. Также можно задействовать вспомогательные группы для отслеживания
обратимости любых токсических изменений, вызванных химическими веществами при исследовании.
Как правило, их распределяют на группу с самым высоким уровнем дозы и контрольную группу. Если
запланировано промежуточное умерщвление, количество животных, включенных в план исследования,
должно быть увеличено на число животных, которых планируется умертвить до завершения исследо-
вания. Этим животным следует провести такое же обследование (включая массу тела, потребление
воды и пищи, гематологические и клинические биохимические показатели, выявление патологий), как и
животным в стадии хронической токсичности основного исследования. Можно также сделать резерв (в
группах промежуточного умерщвления) для измерений, ограниченных особыми, ключевыми показате-
лями. такими как нейротоксичность или иммунотоксичность.

Следует использовать, как минимум три уровня доз, и параллельный контроль, за исключением
тех случаев, когда проводится исследование с максимально возможной дозой. Чаще всего при выборе
уровней доз основываются на результатах краткосрочных исследований повторной дозы или исследо-
ваниях по обнаружению диапазона доз. Необходимо принимать во внимание любые существующие
токсикологические и токсикокинетическме данные по тестируемому или родственным ему веществам.

Если нет ограничений по физико-химической природе или биологическому воздействию иссле-
дуемого вещества, должна быть выбрана самая высокая доза для определения основных органов-ми-
шеней и токсичных эффектов воздействия. Однако следует избегать страданий, тяжелой токсичности,
болей или смерти. Самый высокий уровень дозы следует выбрать для получения признаков интокси-
кации. как. например, о токсичности свидетельствуют изменения уровня сывороточного фермента или
невозможность набрать массу (примерно 10 %).

Однако в зависимости от целей исследования может быть выбрана верхняя доза ниже, чем доза,
подтверждающая наличие токсичности, например, если доза вызывает побочное действие, которое,
тем не менее, слабо отражается на продолжительности жизни или массе тела. Наивысшая доза не
должна превышать 1000 мг/кг в день.

Разница между уровнями доз должна быть направлена на определение зависимости доза-ответ
и установление наивысшего уровня дозы, при которой не наблюдается вредный эффект воздействия
(NOAEL) или других предполагаемых результатов исследования, например. BMD при самом низком
уровне дозы. Условия, которые должны быть приняты во внимание при установлении нижних доз, вклю-
чают: предполагаемый наклон кривой зависимости доза-ответ, дозы при которых могут происходить
важные изменения в метаболизме или вид токсического действия, когда предполагается пороговая
величина, или когда предполагается исходная точка для экстраполяции низкой дозы.

Избранная разница в уровне доз зависит от параметров тестируемого вещества и не может быть
прописана в этом руководстве. Но диапазон от двух до четырех зачастую оптимален для установления
снижения уровней доз. а при использовании очень больших интервалов (например, диапазон примерно
от в до 10) между дозировками предпочтительно добавление четвертой тестируемой группы. При выбо-
ре дозы и разницы в уровнях доз следует использовать [2]. но в целом следует избегать использования
диапазона выше 10. а его применение должно быть обосновано.

При выборе дозы для проведения исследований хронической токсичности и канцерогенности не-
обходимо учесть:

Контрольная группа не должна получать исследуемое вещество. С животными из контрольной
группы следует обращаться также, как и с тестируемыми группами. Если используется среда, контроль-
ная группа должна получать ее в максимальном объеме от используемого в дозировочных группах.

Если результаты предыдущих исследований, проведенных в соответствии с требованиями дан-
ных испытаний, показали, что тест при одном уровне дозы, равной не менее 1000 мг/кг массы тела в
сутки, не выявляет отрицательного эффекта и токсичность является маловероятной на основании дан-
ных. полученных для веществ, близких по структуре, то проведение полного исследования с использо-
ванием трех уровней доз не требуется. Предельная доза 1000 мг/кг массы тела в сутки применяется в
тех случаях, когда есть вероятность воздействия на людей более высоких доз.

Исследуемое вещество вводится перорально через зонд, или с пищей, или с питьевой водой.
Способ и метод введения зависят от цели исследования, фиэическо-химических свойств вещества, его
биологической усвояемости и основного способа, и метода введения в организм человека. Целесоо-
бразность способа и метода введения должна быть обоснована.

При необходимости исследуемое вещество растворяется или высыпается в соответствующую
среду. Необходимо уделять внимание следующим характеристикам среды или других вспомогательных
веществ, в зависимости от конкретного случая: влиянию на абсорбцию, распределению, метаболизму
или накоплению исследуемого вещества: влиянию на химические свойства исследуемого вещества, ко-
торые могут повысить его токсические свойства; влиянию на потребление пищи или воды или обуслов-
ленное питанием состояние животных. Рекомендуется, где возможно, использовать в первую очередь
водные растворы/суспензии. затем рассматривать раствор эмульсии в масле (например, кукурузное
масло), и затем искать возможное решение в других средах. Для сред, отличных от воды, должны быть
известны их токсические свойства. Следует определять устойчивость исследуемого вещества к усло-
виям введения (например, пища). Однородность вводимых растворов или пищи, содержащих тестиру-
емое вещество, (при необходимости) должна подтверждаться аналитически до начала исследования и
периодически (при необходимости) во время него.

При введении вещества с пищей или водой важно, чтобы испытуемое вещество не влияло на
характер питания и водный баланс. В хронических исследованиях с введением вещества с пищей кон-
центрация химического вещества в корме не должна превышать 5 % от общего объема пищи, если
только питание не регламентируется условиями тестирования.

При пероральном введении животные получают дозу исследуемого вещества ежедневно (семь
дней в неделю), как правило, в течение одного года. Любой другой режим дозы, например, пять дней в
неделю, должен быть обоснован.

Когда исследуемое вещество вводится животным через зонд, следует использовать желудочный
зонд или подходящую полую трубку в одно и то же время ежедневно. Как правило, одна доза вводится
раз в день. Когда состав вызывает раздражение, дозу следует вводить дробно. Максимальный объем
жидкости, который может быть введен единовременно, зависит от размеров подопытного животного.
Как правило, объем должен быть как можно ниже и не превышать 1 мп/100г массы, исключая случаи
с водным раствором, где можно использовать 2 мп/100г массы. Колебания в тестовом объеме долж-
ны быть сведены к минимуму путем корректировки концентрации до обеспечения постоянного объема
всех уровней дозы. Потенциально разъедающие или раздражающие вещества являются исключитель-
ным случаем. Их необходимо разбавлять, чтобы избежать тяжелых локальных поражений. Щелочной
баланс растворов, содержащих дозу, как правило, лежит в интервале от 4 до 9 pH.

Несмотря на то. что этот данный стандарт рассчитан на двенадцатимесячное исследование хро-
нической токсичности, план исследования допускает, что может быть применен, как более короткий
(например, шесть или девять месяцев), так и более длинный (например. 18 или 24 месяца) период ис-
следований, в зависимости от целей и задач эксперимента. Отклонения от продолжительности воздей-
ствия в 12 месяцев должны быть обоснованы, особенно в случае сокращения сроков. Вспомогатель-
ные группы, включенные для наблюдения за обратимостью любых токсических изменений, вызванных
химическим веществом, следует держать без дозировок не менее четырех недель, но не более одной
трети от общего периода исследования после прекращения воздействия.

Все животные должны исследоваться на предмет болезненности или смерти и на наличие особых
токсикологических значимых признаков, в частности нейрофункциональных и нейроловедекческих.
обычно в начале и в конце каждого дня. Дополнительно, животные должны проверяться, как минимум
один раз в выходные и праздничные дни. Общее клиническое наблюдение должно осуществляться, как
минимум один раз в день, предпочтительно в одно и то же время, принимая во внимание период мак-
симума предполагаемого воздействия дозы. Клиническое состояние животных следует фиксировать.

Подробное клиническое наблюдение должно быть проведено, как минимум один раз до начала
воздействия (учитывая предмет исследования), к концу первой недели исследования и впоследствии
ежемесячно. Протокол наблюдений должен быть согласован так. чтобы обеспечить минимальную раз-
ницу между отдельными наблюдателями, и независимость от тестовой группы. Эти обследования не-
обходимо делать вне клетки, каждый раз в одном месте, в одно и то же время. Их следует тщательно
фиксировать, желательно используя систему количественных показателей, четко оговоренную испы-
тательной лабораторией. Необходимо следить за тем. чтобы варьирование в условиях наблюдения
было минимальным. Отмеченные признаки должны включать, не только, изменения кожи, шерсти,
глаз, слизистых оболочек, возникновение секреции и экскреции и автономной активности (например,
слезоотделение, пилоэрекция. размер зрачка, аномальный способ дыхания). Изменения в походке, по-
ложении тела, реакции на прикосновение, как и наличие кпоничесхих или тонических движений, стере-
отипах (например, чрезмерное умывание, однообразные движения по кругу) или аномалиях поведения
(например, членовредительство, хождение задом наперед) также должны регистрироваться.

Офтальмологический осмотр с использованием офтальмоскопа или другого подходящего инстру-
мента следует проводить всем животным до первого введения исследуемого вещества. По окончании
исследования этот осмотр желательно провести всем животным, но. как минимум, группе с высокой
дозой и контрольной группе. Если обнаружены изменения, имеющие отношение к терапии, следует ос-
мотреть всех животных. Если структурный анализ или другие данные говорят об офтальмологической
токсичности, тогда частота офтальмологических осмотров должна быть увеличена.

Для химических веществ, для которых предварительные исследования на токсичность с повтор-
ным приемом дозы в течение 28 и/или 90 дней показали потенциальную возможность оказывать нейро-
токсическое воздействие. сенсорную химическую активность к раздражителям различного типа (напри*
мер. слуховые, визуальные и проприоцептивные раздражители) оценку силы захвата и двигательной
активности можно проводить, по выбору, до начала исследования и затем в три. шесть, девять и две-
надцать месяцев. Однако, можно использовать и другие, не приведенные в списке процедуры.

Для химических веществ, где предварительные исследования на токсичность с повторным при-
емом дозы через 28 и/или 90 дней показали потенциальную возможность оказывать иммунотоксиче-
сков воздействие, дальнейшие исследования этого результата могут по желанию проводиться до 12
месяцев.

Все животные должны взвешиваться в начале исследования, как минимум, раз в неделю первые
13 недель и. как минимум, ежемесячно в дальнейшем. Измерения потребления пищи и питательности
пищи следует производить еженедельно первые 13 недель и. как минимум, ежемесячно в дальнейшем.
Необходимо также учитывать потребление воды для исследований, в которых активность потребления
воды изменяется. Измерения потребления воды следует проводить еженедельно первые 13 недель и.
как минимум, ежемесячно в дальнейшем, когда вещество вводится через питьевую воду.

В исследованиях, в которых используются грызуны, гематологические исследования необходимо
проводить, как минимум, на 10 самцах и 10 самках каждой группы в три. шесть и двенадцать месяцев,
всегда используя одних и тех же животных. 8 случае с мышами могут потребоваться вспомогательные
животные с тем. чтобы проводить все необходимые гематологические последования. В исследованиях
с негрызунами пробы берутся у меньшего количества животных (например, четыри особи каждого пола
каждой группы в случае с исследованием собак). Нет необходимости проводить измерения в три месяца,
если за предыдущие 90 дней при аналогичном уровне дозы не наблюдалось воздействия на гематоло-
гические параметры. Образцы должны быть собраны к концу запланированного периода исследования,
в период исследования к трем, шести месяцам и к 12 месяцу непосредственно перед или во время про-
цедуры умерщвления животных. Пробы крови следует брать из указанных мест, например, сердечная
пункция или из ретро-глаэной пазухи и. по возможности, хранить в подходящих условиях. Необходимо ис-
следовать приведенный список параметров: общая и лейкоцитарная формула, содержание эритроцитов,
содержание тромбоцитов, концентрация гемоглобина, гематокрит (гематокритное число), среднее гема-
токритное число (MCV). среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (МСН). концентрация гемогло-
бина в эритроцитах (МСНС). протромби новое время и время образования и активности тромбоп лас тина.
Кроме того, необходимо исследовать тельца Гейнца, или другую атипичную морфологию эритроцитов и
метгемоглобин, если присутствуют любые признаки анемии или других нарушений кроветворения. Если
химические вещества оказывают влияние на кроеетворительную систему, можно также измерить число
ретикулярных клеток и цитологию костного мозга, хотя они не обязательны для регулярного проведения.

Клинические биохимические показатели при исследовании токсического воздействия на ткани и
особенно влияние на почки и печень следует определять в пробах крови, полученных от. как минимум.
10 самцов и 10 самок каждой группы за одинаковые временные интервалы, как предписано для гемато-
логических исследований, всегда используя одних и тех же животных. Для мышей, могут потребоваться
вспомогательные животные с тем. чтобы проводить все необходимые клинические биохимические ис-
следования. Нет необходимости проводить измерения в три месяца, если за предыдущие 90 дней при
аналогичном уровне дозы не наблюдалось воздействия на клинические биохимические параметры.
Рекомендуется голодание для животных (за исключением мышей) вечером накануне забора крови. Не-
обходимо исследовать приведенный список параметров: глюкоза, моча (азот мочевины), креатинин,
общий белок, альбумин, кальций, натрий, калий, общий холестерин, как минимум, два анализа на ге-
патоцеллюлярный анализ (аланин-аминотрансфераза, аслартат-аминотрансфераза. глютаминат де-
гидрогеназа. желчные кислоты), и. как минимум, два анализа на гепатобилиарный анализ (щелочная
фосфатаза, гамма-глутаминтрансфераза. пятинуклеотидаза. общий билирубин, желчные кислоты).
Другие клинические химические показатели, такие как триглицерид натощак, специфицеские гормоны и
холинэстераза могут быть измерены в случае необходимости в зависимости от токсичности вещества.
В целом необходим гибкий подход в зависимости от наблюдаемого и/или ожидаемого воздействия каж-
дого конкретного вещества.

Анализ мочи должен проводиться, как минимум, у 10 самцов и 10 самок каждой группы на образцах,
собранных за одинаковые промежутки времени, как и в случае с гематологией и клинической химией. Нет
необходимости проводить измерения в три месяца, если за предыдущие 90 дней при аналогичном уров-
не дозы не наблюдалось воздействия на мочу. В последние экспертные рекомендации по исследованию
клинической патологии был включен следующий список параметров: внешний вид. объем, осмотическая
концентрация раствора или относительная плотность. pH. общий белок и глюкоза. Другие исследования
включают кетон, уробилиноген. билирубин и скрытую кровь. Дополнительные исследования могут быть
использованы при необходимости расширить изучение наблюдаемых воздействий.

Все животные, участвующие в исследовании, как правило, подвергаются полной, детальной ма-
кросхопической аутопсии, которая включает тщательное исследование наружной поверхности тела,
всех отверстий, черепных, грудных и брюшных полостей и их содержимого. При атом мог быть сделан
резерв (в группах для промежуточных умерщвлений или во вспомогательных группах) для измерений,
ограниченных отдельными, важными показателями, такими как нейротоксичность или иммунотоксич-
ность. Этих животных не нужно подвергать аутопсии и дальнейшим процедурам. Индикаторные живот*
ные могут требовать аутопсии в каждом отдельном случае, на усмотрение руководителя исследования.

Значимые органы следует собрать у всех животных, исключая тех. что указаны выше. Надпочеч-
ник. мозг, придатки яичка, сердце, почки, печень, яичники, селезенка, яички, щитовидная железа (оце-
нив постфиксацию с паращитовидной железой) и матка всех животных (кроме тех, что были найдены
умершими и/или были промежуточно умерщвлены) должны быть отсечены, если необходимо, от при-
легающих тканей и взвешены, как можно быстрее после отсечения для предотвращения высыхания.
В случае, если органы парные, например, почки, надпочечники, оба органа должны быть взвешены от-
дельно. В исследованиях с использованием мышей, взвешивание надпочечных желез не обязательно.

Ткани, которые необходимо подвергнуть консервации в наиболее подходящем средстве фиксации в
качестве образца ткани для дальнейшего гистолатологичесхого исследования, представлены в таблице 1.

Т а 6 л и ц а 1 Ткани, которые необходимо подвергнуть консервации

Все макроскопически*
повреждения

Семке

Поджелудочная железа

Желудок (кардиальный
отдел желудка,
железистый желудок)

Надпочечник

Подвздошная кишка

Паращитовидная железа

(Зубы)

Аорта

Тонкая кишка

Периферические нервы

Яичко

Головной мозг (включая отде-
лы головного мозга, мозже-
чок. мадулла. варолиев мост)

Почка

Гипофиз

Тимус

Слепая кишка

Слезная железа

Простата

Щитовидная железа

Шемса матхи

Печень

Прямая кишка

(Язык)

Свертывающая железа

Легкое

Слюнная железа

Трахея

Толстая кишка

Лимфатические узлы
(как поверхностные, так
глубокие)

Семенные пузырьки

Мочевой пузырь

Двенадцатиперст-ная кишка

Молочная железа (обя-
зательно для самок)

Скелетная мышца

Матка (включая шейку
матки)

Эпидидимис

(Верхние дыхательные
пути, в том числе нос.
носовые раковины, око-
поносо выв пазухи)

Кожа

(Мочеточник)

Глаз (включая сетчатку)

Пищееод

Спинной мозг (три уровня:
шейный, средний - грудной,
поясничный)

(Уретра)

(Бедренная кость с суставом)

(Обонятельная лукови-
ца)

Селезенка

Влагалище

Желчный пузырь (для видов,
кроме крысы)

Яичник

(Грудина)

Часть костного мозга
и/или свежий пунктат
костного мозга

Гардероба железа

 

 

 

 

 

Ткани, приведенные в скобках, не являются обязательными. В случае с парными органами, на*
пример, почки, надпочечники, следует сохранять оба органа. Любые другие органы, считающиеся на
основе известных свойств исследуемого вещества возможными органами-мишенями, также следует
сохранить. Для других органоа/тканей (и в дополнение к отдельно сохраняемым тканям из дыхатель*
ных путей) список органов, как он установлен для перорального введения, должен быть пересмотрен.

Минимальными гистопатологическими анализами должны быть:

Данные для каждого отдельного животного должны содержать все параметры по оценке воздей-
ствия. Дополнительно все данные должны быть сведены в таблицу, отражающую для каждой тестовой
группы количество животных на начало исследования; количество животных, умерших во время ис-
следования или умерщвленных по гуманным соображениям и время каждой смерти или умерщвле-
ния; количество обнаруженных признаков токсичности: описание наблюдаемых признаков токсичности,
включая время начала, продолжительность и тяжесть любых токсических воздействий; количество жи*
еотиых. демонстрирующих патологию, тип патологии и процент животных, демонстрирующих каждый
тип патологии.

Данные контроля предыдущих исследований могут быть полезными при интерпретации результа-
тов настоящего исследования в случаях, когда имеется информация о различиях в контрольных дан-
ных. Данные контроля предыдущих исследований должны предоставляться из той же лаборатории за
последние 5 лет при условии использования животных той же линии и того же возраста.

По возможности, численные результаты должны быть оценены специальными и общепринятыми
статистическими методами. Статистические методы и данные для анализа должны быть выбраны во
время разработки исследования. При необходимости, этот выбор должен предусматривать корректи-
ровку выживаемости.

Отчёт об исследовании должен содержать следующую информацию:

Исследуемое вещество:

Среда (при необходимости):

Подопытные животные:

Данные об условиях проведения исследования:

Результаты:

•анализ мочи;

Статистическая обработка результатов (где это возможно):

Изучение результатов включает:

Заключение

Библиография

УДК 661:615.099 МКС 71.100.01 Т58

Ключевые слова: химическая продукция, воздействие на организм человека, токсичность, хроническая,
енутрижелудочная

Подписано в печать 01.09.2014. Формат 60x841/8.

Уел. печ. л. 1.40. Тираж 36 экз. Зак. 3248.

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ»
123995 Москва. Гранатный лер.. 4.
www.gostinfo.ru info@gosUnfo.ru

Впервые эта аббревиатура появилась во времена СССР, и расшифровывается она как Государственный Стандарт. Со временем количество госстандартов увеличилось, и за их несоблюдение нарушителям грозила уголовная ответственность. Сегодня наблюдается тенденция к сокращению национальных стандартов.

ГОСТ - это государственный стандарт, свод сформулированных требований, предъявляемых государством к качеству и безопасности продукции, работ и услуг межотраслевого значения. Стандарты, подтверждающие, что они прошли проверку и отвечают всем требованиям безопасности, устанавливаются с учетом современных достижений науки, технологий и опыта.

Зачем нужен ГОСТ

ГОСТы призваны регламентировать, какие качества должны быть у продукции, вырабатываемой и продаваемой на территории конкретной страны. В наше время есть госстандарты, касающиеся любой отрасли промышленности и других сфер нашей жизни. Их задача – установить правила по изготовлению:

  • инструментов
  • продуктов питания
  • одежды и обуви
  • транспорта и всего того, без чего жизнь человека невозможна

В госстандартах указываются продукты, которые можно использовать, возможные методы производства, оборудование, на котором будет производиться изделие, технологии, по которым все это должно производиться, и т.д. Госстандарты, принятые в Российской Федерации, в своем названии, кроме аббревиатуры ГОСТ, имеют букву «Р». Это правила сертификации, на основании которых осуществляются самые разные процедуры, включая экспертизу, процессы и разные способы.

Обязательно ли соблюдать нормативы документа

Их соблюдение было обязательным до 1 сентября 2011 г. В то время считалось, что это поможет держать под контролем качество производимых товаров, а значит защищать здоровье и жизнь населения, животных, растений и пр. Однако с этого дня соблюдение ГОСТов не обязательно, оно носит добровольный характер.

Каждый может сам выбирать и покупать товары, по ГОСТу ли они выработаны или без них. И производитель может решить – изготавливать товар по ГОСТу или по ТУ. Но при этом придется учесть, что многие ГОСТы создавались в эпоху натуральной, а не модифицированной продукции. Но речь не о производственных и других сферах, напрямую касающихся жизни и здоровья людей, использовании стандартов для оборонной продукции или защиты данных, которые составляют государственную тайну или другой информации ограниченного доступа В РФ ГОСТы принимает Госстандарт России. В сфере строительства и промышленности, строительных материалов - Госстрой. Но современный мир пытается перейти на технические регламенты.

Отличие ГОСТ от других стандартов

  • ОСТ. Этот стандарт, который устанавливает требования к качеству продукта в конкретной сфере, разрабатывается там, где нет ГОСТов, или их требования нужно уточнять
  • ТУ. В ходе перехода экономики к рыночным отношениям в обиход вошли технические условия - ТУ. Их цель заключается в регламентировании производство продукции, не попадавшей под действие ГОСТа. Требования ТУ, создаваемых предпринимателями-производителями, не должны противоречить обязательным требованиям ГОСТов
  • Технический регламент. Он устанавливает обязательные условия хранения продукции, ее перевозки и продаж. Главное отличие ГОСТа от ТР заключается в том, что госстандарт характеризуется количественными параметрами выпускаемых изделий, а ТР – условиями применения готовой продукции

Похожие госты